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1 、PCR實（shí）驗（yàn）室平麵布局 

     PCR擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區域：試劑貯存和準（zhǔn）備區、標本製備區、擴（kuò）增反應混合物配製和（hé）擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉（chā）汙染，進（jìn）入各個工作區域必須嚴格遵循單一方（fāng）向進行，即隻能從試劑貯存和準備區→標本製備區→擴增反應混合物配（pèi）製（zhì）和（hé）擴增區→擴增（zēng）產物分析區。 各實驗區之間的試（shì）劑（jì）及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
2、實驗室空調通風係統（tǒng）設計及壓（yā）力控（kòng）製 

     PCR實驗室並沒有嚴格的淨化要求，但是為避免各個實驗區域間交叉汙（wū）染的（de）可能性，宜（yí）采用全送全排的氣流組織（zhī）形式。同時，要嚴格控製送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。 

2.1、試劑（jì）貯存和準備區

    該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的（de）製備、試劑的分裝和主反應混合液（yè）的製（zhì）備。試劑和用於（yú）樣品製（zhì）作的材料應直接運送至該區，不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內，並在本區內製備成（chéng）所需的貯存試（shì）劑。 對與氣流壓力的控製，本區並沒有嚴格的要求。 

2.2、標本製備區 

    該區域主要進行的操作為樣本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反（fǎn）應管和測定DNA的合成。 本區的壓（yā）力梯度要求（qiú）為：相對於鄰近區域為正壓，以避免從（cóng）鄰近區進入本區的（de）氣溶膠汙染。另外，由於在（zài）加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的汙染，所以應避免在本（běn）區內不必要（yào）的走動。 

2.3、擴增反應混合物配製（zhì）和擴增區 

    該區域主（zhǔ）要進行（háng）的操（cāo）作為DNA擴（kuò）增。此外，已製備的DNA模板 (來自樣本製備區)的加入和（hé）主（zhǔ）反應混（hún）合液(來自試劑貯存和製備區)製備成反應混合液等（děng）也可在本區內進行。 本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為負壓，以（yǐ）避免氣溶膠（jiāo）從本區漏出。為避免氣溶膠（jiāo）所致的汙（wū）染，應盡量減（jiǎn）少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超淨台內進行。 

2.4、擴增產物分析區 

    該區域主要進（jìn）行的操作為擴增片段的測定。 本區是最主要（yào）的擴增產（chǎn）物汙染來源，因此對本（běn）區的壓力梯度的要求為：相對於鄰近區域為負壓，以避免擴增產（chǎn）物從本區擴散至其它區域。

3、汙染的預防與控製 

      PCR實驗（yàn）室設計（jì）的核心問題（tí）是如（rú）何避免汙染。在實際工作中，常見的有以下幾種汙染類型：擴增產物的汙染（rǎn）；天（tiān）然基（jī）因組DNA的汙染；試劑的汙染（rǎn）以及標本間（jiān）的汙染。由於一旦發生汙染，實驗就必須停（tíng）止，直到找到汙染源（yuán）為止，而且實驗結果必須作廢，需重新進行實驗。所以發生汙染後再圍繞（rào）實驗室來尋找汙染源（yuán）不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免汙染，首先應是預防，而不是排除。

3.1、工作區域（yù）的嚴格（gé）劃分 

    （1）各個實驗區域設置合理； 

    （2）各個實驗區（qū）域要有明顯的標記（如醒（xǐng）目的門牌或不同的地（dì）麵顏色等），以避免各個不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。 

3.2、合理（lǐ）的係統（tǒng）設置 

   （1）合理的空調通風係統（tǒng）設置，盡量（liàng）采用全送全排的空調係統； 

   （2）嚴格的氣流壓力控製，保證不同的實驗區內不同的壓力要求。 

3.3、 規範（fàn）的操作 

   （1）擴增檢驗實驗室的技術（shù）人員必須進行上崗培訓，經培訓合（hé）格後才能從事臨床基因擴增檢驗的工作； 

   （2）在實驗操作過程中，操作者必須戴手（shǒu）套，並經常更換。此外，操（cāo）作（zuò）中使（shǐ）用一次性帽子也是一個有效（xiào）地防止汙染的措（cuò）施； 

   （3）清（qīng）潔工作及時、正確。實驗工作結束後，必須立即對本（běn）區（qū）進行清潔。除常規的消毒（dú）液體對（duì）表麵進（jìn）行擦拭消（xiāo）毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。 

3.4、嚴格的管理 

   （1）嚴格控製進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室（shì），有條件的情況下要設置獨立的（de）通道和（hé）進出整個實驗區的門； 

   （2）盡量減少在實驗區（qū）內不必要的走動以減少交（jiāo）叉（chā）汙染（rǎn）的可能性。 

   （3）擴增產物分析區是最主要的擴增產物汙染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，必須經消毒液浸泡消毒後在遠離實驗室的地方（fāng）棄掉，用過的吸（xī）頭等一次性（xìng）材料（liào）也應經消毒液浸泡（pào）消毒後統一處理，如焚燒等； 

   （4）擴增產物分析區可能會用到（dào）某些可致基因突變和有毒物質，應特（tè）別注意實驗人員的安全（quán）防護。 

3.5、完備（bèi）的實驗室（shì）配套設（shè）施 

    完備的實驗室配套設施是保證實驗工作（zuò）的必（bì）要條件，應根據各個實驗室（shì）實驗內容的不同配備相應的設（shè）備和儀器，如超淨工作台、離心機、加樣器等。